KMiNT21: Personal Blog
  • Home
  • About

MailTwitterFacebookFlickr
Фев 22 2021

Микроскопирование триходермы и ее “соседей по палате”

Posted by KMiNT21
Tweet

Попробовал вырастить триходерму в чистом новом пластиковом контейнере для еды. А то все не решал куда применить “почти-что-PDA-среду”. Картофельные очистки долго вываривал, даже от моркови добавил. 🙂 Проходила она дробную стерилизацию в несколько дней (да, неудобно без автоклава).

Сделал две таких коробочки. Быстро их залил, чуть приоткрыв. Даже закрутил в пакеты для дополнительной изоляции. И поставил над батареей, чтобы процесс быстрее шел.

Сегодня, наконец, дошли руки до них. Казалось, что все красиво выросло. Пора же в дело пускать. Открыл, присмотрелся внимательно – ох… Не все так радостно.

Сначала обнаружил гриб с длиннющими цепочками конидий, который уже когда-то я пытался идентифицировать. Похож он на Penicillium cheresanum, но изолировать и изучать детально мне не захотелось. Почему? Потому что еще увидел две зоны роста гриба, очень похожего на аспергилл. Еще это может быть особым видом пеницилла (коротко-компактный, Penicíllium brevicompáctum). Но внятных фотографий в гугле я не нашел. На большом увеличении даже и не стал рассматривать. Уже и так аж два вида контаминанта. И размножать плесень, выделяющую афлатоксины, в мои планы не входит. Потому сразу отнес на утилизацию (залил хлоркой).

Не сразу вспомнил, что у меня есть еще второй контейнер. 🙂 Откладывать, конечно же, не стал. Отщипнул для изучения немного мицелия в “подозрительных местах”. Само собой, триходерма и тут в одиночестве жить не планировала.

Тут я уже решил идти до конца! Надо-таки попробовать идентифицировать врага. Чтобы посмотреть на него на большом увеличении, нужно его изолировать от общей массы мицелия. Иначе на просвет изучить его будет невозможно.

Очень долго я провозился с отделением нужного кусочка мицелия. Это какая-то настоящая микрохирургическая операция! Сначала я пробовал держать карманный микроскоп левой рукой, не шевелясь, а правой рукой палочкой как-то зацепить и отделить посторонний гриб. Сложность не только в размерах всего, а еще и с визуальным контролем. Изображение в окуляре инвертировано по осям. Т.е., если я двигаю руку вперед, в микроскоп я вижу движение в обратную сторону. А тут еще и движения вверх-вниз надо контролировать, занося импровизированный манипулятор над нужной точкой и опуская вниз, придавливая, пытаясь отделить нужные гифы целевого гриба.

На фотографии, где видно спичку (для масштаба), можно увидеть как раз малюсенький кусочек мицелия, от котого, в свою очередь, надо было отщипнуть практически точку. 🙂

Первая серия попыток не увенчалась успехом. Перешел на настольный микроскоп и медицинскую иглу. Там оказалось работать удобнее. Очередная серия попыток и … перепроверяю… Да, получилось!

Капнул на образец краситель (метиленовый синий) и накрыл покровным стеклом. Ждать не стал, решил сразу оценить обстановку на увеличении 400x. Сделал несколько кадров и пошел мучать Google Images, пока плесень подкрашивается.

Уверенного ответа на вопрос “что это” у меня так и не сформировалось. Уж как-то сильно плотные “метелки” для пеницилла. В гугле находятся изображения каких-то видов аспергилла, которые похожи на мой экземпляр.

Вернулся, капнул несколько капель воды по краям покровного стекла, чтобы теперь вытянуть лишний краситель наружу. Поставил 90x объектив (с окуляром 10x это увеличение 900x), нанес капельку иммерсионного масла и принялся вглядываться. Сделал очередную серию снимков и пошел дальше думы думать. Ведь тут как. Если это пеницилл, то, в принципе, можно и не выбрасывать все. Но нужно обязательно исключить аспергилл.

Из аспергиллов были похожи (насколько можно верить этим сайтам) только виды Aspergillus parasiticus и Aspergillus flavus, да и то только на таком увеличении. Значит остается только по характерным признакам проверять.

Итак, кондиеносцы (условные “ножки” гриба) тут септированные (септа = перегородка). Это как раз признак пеницилла. У аспергилла, в свою очередь, ситуация обратная. Значит его можно смело исключать.

Да, кстати, а вот же и сама виновница торжества. 🙂 Trichoderma viride under microscope:

..

CONTINUE READING >
0 comments
Фев 14 2021

Первый бактериальный посев

Posted by KMiNT21
Tweet

У хомяка долго что-то никак не проходит полностью “закисание” глаз. Уже и другим препаратом капаю (сменил антибиотик хлорамфеникол на сульфат гентамицина). Но через два дня после окончания снова появилось.

Решил проверить действует ли этот антибиотик на его эту заразу. Взял мазок с глаза, засеял на среду PSA (картофельно-сахарозный агар).

Вот так вот только приоткрыв чашку Петри я занес еще споры мукору (плесень) воздухом или на палочке, что переносил. Ну а кусочек фильтровальной бумаги, на которую нанес 4 капли антибиотика, в первый раз я положил совсем поздно. 🙂

Пересеял аккуратно микробов в другую чашку (неотрывными зигзагообразными движениями делается такой “росчерк”). И в этот раз бумажку с антибиотиком положил сразу.

Примерно через 10 часов инкубирования с температурой около 29 градусов получился такой результат. Какие это бактерии – ни малейшего представления. Но, судя по отсутствию роста в зоне антибиотика, капли точно не бесполезные.

Смотреть на бактерии в микроскоп пока не стал. Смысла мало. В теории можно было бы купить реактивов и научиться делать исследования типа окраски по Грамму, но для полной идентификации в лабораториях применятся слишком большее разнообразие реактивов и питательных сред. И их только заказывать надо.

Потому микология в этом смысле доступна. И питательные среды сам готовишь, и в микроскоп есть на что посмотреть. В общем, рекомендую. 🙂

CONTINUE READING >
0 comments
Фев 9 2021

Советские чашки Петри, метиленовый синий и фиалиды триходермы

Posted by KMiNT21
Tweet

Стерильные пластиковые чашки Петри, конечно, хороши, но они одноразовые. Докупил еще 10 стеклянных чашек Петри советского производства на замену двум треснувшим современным.

А еще теперь у меня есть краситель. 🙂 Метиленовый синий. Теперь прозрачные объекты наблюдать будет намного удобнее.

На фото:

“Новогодние посевы” двух видов триходермы

  • Trichoderma viride
  • Заготовленный смыв спор и мицелия с поверхности агара
  • Пополнение
  • Немного раздавил/разрушил мицелий, когда придавил покровным стеклом. Все распалось. В кадре много отдельных конидиеспор и … (?).
CONTINUE READING >
0 comments
Фев 4 2021

Приобрел нормальный микроскоп, наконец

Posted by KMiNT21
Tweet

Так как возможности карманного микроскопа “Carson MicroBrite Plus 60x 120x” довольно скромны, а мне хотелось получить серьезное увеличение, я обзавелся вторым прибором. Купил старый советский “МБР-1”.

Осталось еще его немного “подшаманить”, почистить нормально все стекла и др., но в целом уже для моих задач хватает. Можно с иммерсионным объективом получать увеличение до 900x (ну или даже 1350x с окуляром 15x).

CONTINUE READING >
0 comments
Янв 19 2021

Заглубленная теплица №2

Posted by KMiNT21
Tweet

Коллажик из фото этапа №2 (из 3-x) летней строки-копки заглубленной теплицы в селе.

Во время летнего потопа 2020 досталось и нам, потому этап укрепления стен резко сменился этапом постройки новых. Размер теплицы – 6 на 4 метра (24 квадратных метра). Пришлось весь этот грунт перелопатить и наполнить полипропиленовые мешки (по 4 ведра). Колючую проволоку для сцепления рядов не использовали. Мешки уложены под небольшим наклоном и хорошо утрамбованы.

Так же ниже уровня пола закопаны дренажные перфорированные гофрированные трубы (пять рядов, D=100), которые сходятся в одну (коллектор, D=160). Вместе они образуют теплообменник.

CONTINUE READING >
0 comments

Languages

  • Русский
    • English

ABOUT ME

Hi there. It's blog about my life and all related to it. You can find my posts about IT, foto, soccer, traveling, music etc here...

Свежие записи

  • Микроскопирование триходермы и ее “соседей по палате”
  • Первый бактериальный посев
  • Советские чашки Петри, метиленовый синий и фиалиды триходермы
  • Приобрел нормальный микроскоп, наконец
  • Заглубленная теплица №2

Свежие комментарии

  • KMiNT21 on Стритовальщики – читеры
  • KMiNT21 on Как придумать хороший геймплей?
  • Igor on Как придумать хороший геймплей?
  • DimaX on Два колеса – хорошо, но четыре – лучше
  • KMiNT21 on Два колеса – хорошо, но четыре – лучше

FROM TWITTER

@JohnEskimSmith Кстати, сделал-таки "сигналку". Как только (и пока) за дверью в подъезде есть движение, в кабинете… https://t.co/Gk913khdXp
@JohnEskimSmith Кстати, да. Надо подумать как привязать все это к подъездной камере (или свету с встроенным датчико… https://t.co/b0muOZ3PEK

Flickr Photos

1 2 … 18 NEXT

Рубрики

  • Cooking
  • IT
  • Traveling
  • Без категории
  • Микробиология
  • Фото

FROM TWITTER

@JohnEskimSmith Кстати, сделал-таки "сигналку". Как только (и пока) за дверью в подъезде есть движение, в кабинете… https://t.co/Gk913khdXp

Flickr Photos

Connect

Twitter
Facebook
Google+
Flicker
LinkedIn
Vk.com

  • English
  • Русский